可用作ELISA板的物質很多,常用的是聚苯乙烯和聚氯乙烯,它們具有較強的吸附蛋白質的性能,抗體或蛋白質抗原吸附其上后保留原來的免疫活性。作為塑料,可制成各種形式。在ELISA測定過程中,它們作為載體和容器,不參與化學反應。加之它們的價格低廉,所以被普遍采用。專用于ELISA測定的產品也稱為ELISA板,國際通用的標準板形是8×12的96孔式。
良好的ELISA板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間性能相近。
①聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工藝的差別,各種產品的質量差異很大。因此每一批號的聚苯乙烯制品在使用前須檢查其性能。常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為 10ng/ml)包被 ELISA 板各孔后,每孔內加入適當稀釋的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后分別測每孔溶液的吸光度。控制反應條件,使各讀數在0.8左右。計算所有讀數的平均值。所有單個讀數與平均讀數之差應小于10%。
②另一中是與聚苯乙烯類似的塑料聚氯乙烯。作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特點為質軟板薄,可切割,價廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯對蛋白質的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有時也略高。
為比較不同固相在某一ELISA測定中的優劣,可用以下方法加以檢驗:用其它免疫學測定方法選出一個典型的陽性標本和一個典型的陰性標本。將它們分別進行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預定的 ELISA 操作步驟進行測定,然后比較測定結果。在哪一種載體上陽性結果與陰性結果判別最大,這種載體就是這一 ELISA測定的最合適的固相載體。
ELISA 板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特定的比色計上迅速讀出結果。現在已有多種自動化儀器用于微量反應板型的 ELISA 檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操作的標準化極為有利。