日本成人理论片在线观看,欧美日韩岛国在线观看,国内自拍av一区二区在线观看,男女爽爽视频

熱門搜索:ELISA試劑盒,生化試劑,耗材,生物化學(xué)品,抗體
產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁(yè) > 技術(shù)文章 > PCR系列?動(dòng)物基因組DNA快速提取試劑盒

PCR系列?動(dòng)物基因組DNA快速提取試劑盒

發(fā)布時(shí)間: 2023-04-11  點(diǎn)擊次數(shù): 501次

動(dòng)物基因組DNA快速提取試劑盒適合于從新鮮或凍存組織,如培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞,血液,唾液,毛發(fā)(含羽毛),鼠尾及鼠耳等動(dòng)物組織中快速提取基因組DNA,用于后續(xù)的基因 型鑒定等PCR分析檢測(cè)。

 

操作步驟:

提前準(zhǔn)備可設(shè)置恒定溫度為 55℃和 95℃的熱蓋金屬浴或者PCR儀;提取試劑A在 2~8℃條件下會(huì)出現(xiàn)絮狀(結(jié)晶)沉淀,為正常現(xiàn)象,試劑平衡至室溫后可自行消失,不影響使用;使用前取出所有試劑于室溫下平衡,顛倒混勻后備用。

1. 消化液的配制:按照樣本數(shù)量n配制消化液,具體配制方法如下:分別吸取(n× 50µL提取試劑A+n× 2.5µL提取試劑B)加入潔凈離心管中,移液器吹吸充分混勻,分裝至 0.2mL PCR(離心管)中,每孔 52µL(如樣本過(guò)多,可提前預(yù)制,于 2~8℃短暫保存,2 小時(shí)內(nèi)使用)。

 

2. 不同組織樣本基因組DNA的提取:

培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞:將收集到的細(xì)胞除去培養(yǎng)液,吸取消化液充分吹吸重懸細(xì)胞后,轉(zhuǎn)移至原消化液孔中。

血液/唾液:吸取不超過(guò) 10µL的血液或者唾液加入消化液中,移液器吹吸混勻。

毛發(fā)(含羽毛):實(shí)驗(yàn)前用 75%的乙醇沖洗剪刀和鑷子。剪除毛發(fā)(含羽毛)的多余部分,僅需保留毛發(fā)的根部(羽軸中羽根)區(qū)域,并將其盡可能剪碎至消化液中,移液器吹吸混勻。鼠尾/鼠耳:實(shí)驗(yàn)前用 75%的乙醇沖洗剪刀和鑷子。剪取不超過(guò) 0.5cm的小鼠尾尖或耳尖,并將其盡可能剪碎至消化液中,移液器吹吸混勻(一般情況下,重量約為 10mg的 0.5cm長(zhǎng)的鼠尾或鼠耳剛好能浸沒在含有 50μL消化液的PCR管中)。對(duì)于新鮮的鼠尾或鼠耳,建議盡量在剪下鼠尾或鼠耳后 30 分鐘內(nèi)進(jìn)行基因組DNA提取,否則宜盡快冷凍存放。

 

3. 將樣本置于 55℃熱蓋金屬浴或者PCR儀,孵育 10 分鐘。

4. 將樣本置于 95℃熱蓋金屬浴或者PCR儀,孵育 5 分鐘(孵育結(jié)束后,組織未消化屬于正常現(xiàn)象,不會(huì)影響試劑盒的檢測(cè)效果)。

5. 將上述提取樣本置于-20℃冷卻 5 分鐘,或 4℃冷卻 15 分鐘以上,以避免氣溶膠污染,瞬時(shí)離心后取上清立即進(jìn)行PCR檢測(cè)(若需長(zhǎng)期保存樣本,應(yīng)將未消化的組織去除或將提取物轉(zhuǎn)移到新的離心管中。大部分情況下,提取物 4℃能保存至少 1 個(gè)月,-20℃至少能 保存一年)。



  • 聯(lián)系電話電話021-65681082
  • 傳真傳真
  • 郵箱郵箱2820057736@qq.com
  • 地址公司地址上海市楊浦區(qū)航都路18號(hào)
© 2024 版權(quán)所有:上海茁彩生物科技有限公司   備案號(hào):滬ICP備17016761號(hào)-2   sitemap.xml   管理登陸   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)       
  • 公眾號(hào)二維碼

聯(lián)